半制備液相色譜儀的開機與系統自檢流程解析
1.開機準備與系統自檢?
電源啟動順序：先開啟計算機電源，待系統穩定后依次啟動高壓輸液泵、柱溫箱、自動進樣器及檢測器，確保各模塊自檢完成。
軟件聯機：雙擊色譜工作站，輸入用戶權限并選擇對應的色譜系統，建立儀器方法組。
2.流動相配制與儀器沖洗?
流動相選擇與過濾：根據樣品性質配制流動相（需色譜級試劑），使用0.45μm或0.22μm濾膜過濾（有機相用有機濾膜，水相用水系濾膜）。
泵排氣泡：將泵頭吸濾頭浸入流動相，通過注射器抽液閥排空氣泡，設置流速3-5mL/min沖洗泵頭5分鐘，確保無氣泡殘留。
進樣針清洗：通過軟件控制自動進樣器進行多次操作，或手動用純甲醇沖洗注射器以去除氣泡。
3.色譜柱平衡與基線監測?
平衡系統：設置初始流速和流動相比例，運行泵至壓力穩定，通過工作站實時監測基線，待基線平穩后準備進樣。
柱溫控制：若使用柱溫箱，需提前設置溫度（通常為室溫或根據方法要求），確保分離條件穩定。
4.樣品進樣與分離?
進樣操作：將樣品溶解過濾后，通過自動進樣器或手動進樣閥注入樣品（典型進樣量0.1-2000μL），設置保留時間并啟動分離程序。
梯度洗脫：若需梯度分離，通過軟件設置溶劑比例變化程序，動態混合流動相以實現高效分離。
數據采集：檢測器實時采集信號（如紫外吸收或蒸發光散射信號），工作站生成色譜圖并記錄保留時間及峰面積數據。
5.關機與系統維護?
色譜柱清洗：
若流動相含緩沖鹽，先用高比例水（如90%水/10%有機相）沖洗1小時，再用純有機相（甲醇/乙腈）沖洗30分鐘，最后保存于純有機相中。
無緩沖鹽時，直接用有機相沖洗30分鐘。
儀器關機：停流速后關閉工作站，依次關閉檢測器、泵、柱溫箱及電源，最后關閉計算機。
管路維護：長期停用時，管路需充滿純甲醇以防止溶劑揮發或污染。
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